SV-40轉化肺成纖維細胞試劑盒
SV-40轉化肺成纖維細胞試劑盒（SV-40 Transformed Lung Fibroblast Cell Kit），是基于酶聯免疫吸附法（ELISA）原理研發的體外診斷/科研檢測試劑盒，可特異性檢測相關細胞培養樣本中肺成纖維細胞標志物、纖維化相關因子、增殖相關蛋白及信號通路相關分子的含量，也可用于該細胞培養過程中增殖活性監測、纖維化程度評估及藥物作用效果檢測，經特異性驗證、靈敏度測試及重復性實驗確認，無交叉反應，檢測結果準確可靠，無試劑降解、雜菌污染等問題。該細胞株是通過猿猴病毒40（SV-40）大T抗原慢病毒轉化原代肺成纖維細胞獲得的永生化細胞株，保留肺成纖維細胞的典型特性，同時具備無限傳代能力，核心特性是表達肺成纖維細胞特異性標志物（如波形蛋白Vimentin、α-平滑肌肌動蛋白α-SMA），可分泌纖維化相關因子，參與肺組織修復、纖維化進程調控，廣泛應用于肺纖維化發病機制研究、呼吸系統疾病研究、抗纖維化藥物篩選等領域，是評估肺成纖維細胞功能、纖維化程度及藥物干預效果的重要研究模型，可用于驗證抗纖維化藥物對成纖維細胞增殖的抑制作用研究。本試劑盒核心特征是特異性強、操作便捷、檢測快速，可精準定量相關指標含量，廣泛應用于呼吸學科研、免疫學科研、藥物研發、細胞生物學實驗等領域，是臨床、科研領域的核心肺成纖維細胞相關檢測工具。
檢測原理
本試劑盒的核心檢測原理，基于酶聯免疫吸附法（ELISA），聚焦相關細胞檢測指標（肺成纖維細胞標志物、纖維化因子、增殖蛋白、信號通路分子等）的抗原抗體特異性結合特性，結合肺成纖維細胞功能檢測的精準需求設計：試劑盒預先將目標檢測指標（如Vimentin、α-SMA、纖維化相關因子）特異性抗體包被于酶標板上，加入待檢測樣本（相關細胞培養上清、細胞裂解液等）后，樣本中的目標指標會與酶標板上的抗體特異性結合，形成抗原-抗體復合物；洗滌去除未結合的雜蛋白、肺成纖維細胞碎片、無關細胞因子及其他肺組織相關蛋白后，加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的二抗，與復合物特異性結合，形成“包被抗體-目標指標-酶標二抗"的三明治結構；再加入底物液（TMB），HRP催化底物發生顯色反應，顯色強度與樣本中目標指標的含量呈正相關，通過酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），對照標準曲線即可計算出樣本中目標指標的具體含量。檢測流程規范：樣本采集后需及時處理（相關細胞培養上清離心分離、細胞裂解液制備），按照試劑盒說明書稀釋樣本；酶標板平衡至室溫后，依次加入標準品、樣本及空白對照，37℃孵育30分鐘；洗滌3-5次后加入酶標二抗，37℃孵育20分鐘；再次洗滌后加入底物液，37℃避光孵育15分鐘；加入終止液終止反應，10分鐘內用酶標儀測定OD值，計算檢測結果。
產品特點
本產品針對相關細胞指標檢測需求優化制備，核心特點如下：
1. 特異性強：采用高特異性目標指標（肺成纖維細胞標志物Vimentin、α-SMA、纖維化因子等）單克隆抗體，可特異性結合樣本中的目標分子，不與正常原代肺成纖維細胞雜蛋白、其他細胞系蛋白及無關因子發生交叉反應，檢測特異性＞99%，確保檢測結果精準，有效規避肺成纖維細胞相關檢測中的干擾因素，同時可有效區分肺成纖維細胞特異性標志物的假陽性與真實表達水平；
2. 質控嚴格：每批次試劑盒均通過靈敏度、重復性、特異性及穩定性檢測，附完整QC報告，確保批內變異系數（CV）＜8%、批間變異系數（CV）＜10%，檢測靈敏度可達0.1ng/mL，符合科研標準，可精準監測相關細胞培養過程中相關指標的微量變化，助力藥物干預效果及肺纖維化調控效果評估；
3. 操作便捷：試劑盒含全套檢測試劑（包被酶標板、標準品、酶標二抗、底物液、終止液、洗滌液等），無需額外配制核心試劑，步驟簡單，全程可在2.5小時內完成，適配常規細胞生物學實驗室操作，新手易上手；
4. 樣本兼容廣：可適配相關細胞培養上清、細胞裂解液、細胞接種后動物血清/肺組織勻漿等核心樣本類型，樣本用量少（僅需50μL/孔），無需復雜預處理，僅需簡單離心、稀釋即可檢測，適配肺成纖維細胞培養、藥物篩選、肺纖維化機制研究等多場景樣本；
5. 適配場景廣：可用于相關細胞增殖活性監測、纖維化程度評估、肺成纖維細胞標志物及信號通路相關分子表達檢測，肺纖維化發病機制、呼吸系統疾病發病機制研究，抗纖維化藥物、呼吸系統藥物的篩選與效果評估，以及呼吸學科研、免疫學科研、藥物研發實驗室的常規檢測。
適用樣本類型
本試劑盒適配相關細胞樣本的體外檢測與科研實驗，適用樣本類型明確：相關細胞培養上清樣本（對數期細胞培養上清，離心去除細胞碎片）、細胞裂解液樣本（無菌收集細胞后裂解，離心取上清）、細胞接種后動物血清樣本（靜脈采血，離心分離，避免溶血）、肺組織勻漿樣本（肺組織破碎后離心取上清）；實驗場景涵蓋相關細胞增殖、纖維化程度監測，肺成纖維細胞標志物及信號通路相關分子表達檢測，肺纖維化發病機制、呼吸系統疾病發病機制研究，相關藥物篩選與效果評估，以及相關實驗室的常規檢測。推薦檢測體系：使用試劑盒配套酶標板，酶標儀（波長450nm），按照說明書步驟操作；樣本稀釋比例為1:10（細胞裂解液、肺組織勻漿可根據濃度適當調整），標準品濃度梯度為0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL，參考區間為0.2~1.3ng/mL（具體以說明書為準）。（具體樣本處理方法請參考產品說明書，該細胞為貼壁細胞，培養需遵循貼壁細胞培養規范，采用成纖維細胞專用培養基，接種密度不低于50萬個/mL，復蘇后需給予一定恢復期，定期觀察細胞形態、增殖狀態及纖維化相關表型，避免密度過低導致不增殖，維持細胞貼壁狀態避免脫落影響檢測結果）
儲存與注意事項
1. 試劑盒需全程2-8℃避光冷藏儲存，嚴禁-20℃冷凍或常溫放置，避免溫度波動導致試劑降解、抗體活性喪失；
2. 標準品、酶標二抗等試劑開封后，密封冷藏保存，1個月內用完，目標指標標準品避免反復凍融，防止其蛋白結構破壞，底物液需避光保存；
3. 樣本采集后及時處理，相關細胞培養上清、細胞裂解液冷藏24小時內完成檢測，動物血清、肺組織勻漿冷藏或-20℃短期保存，48小時內完成檢測，避免樣本變質、目標指標降解，細胞樣本需新鮮采集，避免細胞活力下降、纖維化表型異常影響檢測結果；
4. 操作時嚴格遵循無菌規范，佩戴防護用品，避免試劑、樣本接觸皮膚黏膜；檢測過程中控制孵育溫度與時間，洗滌充分，避免未結合試劑殘留導致結果偏差；
5. 底物液具有潛在刺激性，終止液為酸性溶液，操作時需謹慎，避免接觸衣物與皮膚，檢測完成后按生物安全規范處理廢棄試劑與酶標板；
6. 相關細胞樣本需無菌采集與處理，細胞裂解液需充分裂解細胞，離心去除細胞碎片及雜質后再進行檢測，避免雜質干擾檢測結果；培養上清需在細胞對數期采集，避免細胞凋亡釋放的蛋白酶導致目標指標降解，同時避免培養體系中血清濃度過高影響檢測準確性，藥物干預實驗中需避免藥物本身干擾檢測結果，纖維化誘導實驗中需注意樣本采集時機。
訂購信息
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以上信息僅供參考，具體請已產品說明書為準。
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